N末端タグ鋳型DNAの構造
Ｎ末端タグ鋳型DNAの構造および各パートの配列は以下の通りです。
tag sequenceは下表のいずれか１つを選んでください。または任意の配列を用意してください。
Linker_Nは適当なプロテアーゼ認識配列に変更可能です。
Construct
| 5′ UTR | 3’UTR | ||||
| 5′ | ATG | STOP | 3′ | ||
| T7 Promoter | Enhancer | tag sequence |
Linker_N | ORF | Tail sequence |
Part / Sequence
| Region | Site | DNA Sequence | Tag |
| 5′ UTR | T7 Promoter | CCCGCGAAAT TAATACGACT CACTATA | |
| Enhancer | GGGCTCACCT ATCTCTCTAC ACAAAACATT TCCCTACATA CAACTTTCAACTTCCTATT | ||
| Translated Region | Start codon | ATG no-tagの場合は除く | |
| tag sequence | no-tag | ||
| CAT CAT CAT CAT CAT CAT | 6x His | ||
| GAC TAC AAG GAT GAC GAT GAC AAG | FLAG | ||
| TAT CCT TAT GAC GTG CCT GAC TAT GCC | HA | ||
| TGG TCC CAC CCT CAA TTC GAG AAG | strep II | ||
| Linker_N | CTC CAG CAG GGA GGT ACT ( Leu-Gln-Gln-Gly-Gly-Thr ) | ||
| ORF | ATG + NNNNN ・・・ ・・・NNNNN | ||
| Stop codon | TAA, TAG, TGA | ||
| 3′ UTR | Tail sequence | AAAAAAAAAA GAGCTCTTGG ATCCGGCCAT AAGGGCCTGATCCTTCGAGG GGGGGCC |