C末端タグ用 2nd PCRプライマーの設計

C末端タグ用 2nd PCRプライマーの設計

You are here:
< Back

 

2nd PCRプライマーは、ORFに依存しない設計ですので、下記のプライマーは、C末端タグ用 1st PCR の産物に対して、ユニバーサルにご利用できます。

挿入するタグが下表にある場合、特に設計・サイクル検討する必要はありません。3種類のプライマーが必要になります。

各種プリマ―濃度は、下図の通りですが、10 μMと 100 nM の2種類ありますので、調製時はご注意ください。

cterminus 2nd PCR Primers

Forward Primer CF1 ( 10 μM )

Primer name  Primer sequence 5′ to 3′
2nd_CF1 CCCGCGAAAT TAATACGACT CACTATAGGG CTCACCTATC TCTCTACACA AAACATTTCC

 

Forward Primer CR1 ( 100 nM )

Primer name  Primer sequence 5′ to 3′
2nd_His_CR1 CCCTCGAAGG ATCAGGCCCT TATGGCCGGA TCCAAGAGCT CTTTTTTTTT TTTAATGATG ATGATGATGA TGAGTACCTC CCTGCTGG
2nd_FLAG_CR1 CCCTCGAAGG ATCAGGCCCT TATGGCCGGA TCCAAGAGCT CTTTTTTTTT TTTACTTGTC ATCGTCATCC TTGTAGTCAG TACCTCCCTG CTGG
2nd_HA_CR1 CCCTCGAAGG ATCAGGCCCT TATGGCCGGA TCCAAGAGCT CTTTTTTTTT TTTAGGCATA GTCAGGCACG TCATAAGGAT AAGTACCTCC CTGCTGG
2nd_strepⅡ_CR1 CCCTCGAAGG ATCAGGCCCT TATGGCCGGA TCCAAGAGCT CTTTTTTTTT TTTACTTCTC GAATTGAGGG TGGGACCAAG TACCTCCCTG CTGG
2nd_XXX-tag_CR1* CCCTCGAAGG ATCAGGCCCT TATGGCCGGA TCCAAGAGCT CTTTTTTTTT TTTA RRR—RRR AGTACCTCCC TGCTGG

任意のタグを挿入する場合 2nd_XXX-tag_CR1の RRR—RRR 部分を変更してください。

 

Reverse Primer NCR2 ( 10 μM )  : C末端用と共通です

Primer name  Primer sequence 5′ to 3′
2nd_NCR2 GGCCCCCCCTCGAAGG