当社標準プロトコールでの１反応(110 ul)よりも大きなスケール(5反応分 550 ul)での混合法で、収量が1.5倍程度に増加する傾向があります。サンプル110 ulでタンパク質収量が小さい場合は、まずサンプルサイズ550 ul程度でお試し頂くのもご検討ください。翻訳試薬の調製はサンプルn倍の場合、Wheat Germ Extract, Amino Acid Mix共にn倍量となります。

透析カップの内側（試料溶液）に翻訳液を入れ、透析外液としてアミノ酸ミックスを用いるという、一般的な透析法をご利用いただけます。通常透析外液は20倍から100倍容量が一般的です。

１サンプル分の透析法による翻訳反応液組成の例を示します。

試料溶液（翻訳液）組成

下記例で使用する透析カップ：
サーモフィッシャーサイエンティフィック社製Slide-A-Lyzer™ Mini透析ツール (試料0.1 mℓ、分子量カットオフ 3.5K)

1. 上記組成のうち、まずmRNA溶液を除いたmixtureを調製し、mixtureを室温に戻してからmRNA溶液に加え、泡をたてないように優しくポンピングします。
2. 24穴タイタープレート1ウェルにMilliQで4倍希釈したAmino Acid Mixを 2ml入れ、プレートの蓋をします。
3. プレートの蓋に透析カップを挟み込みます。
   ＊2 mlのエッペンドルフチューブが透析カップと合致しますので、2 mlのエッペンドルフチューブで透析可能です。
4. 調製した試料溶液110 μℓを全量吸い取り、透析カップに泡が入らないようにやさしく注入します。
   ピペットの2段階プッシュは泡立ちの原因となるのでお避け下さい。その後、透析カップの蓋を閉じます。この時、試料溶液(反応層)の液面と透析外液(Amino Acid Mix)の液面が同じレベルか、試料溶液の液面が若干低いようにセットしてください。
5. 16°Cのインキュベーターへ入れ一晩（10時間以上）反応させます。
6. サンプルをポンピングで軽く混ぜてエッペンチューブに回収し、遠心分離（15,000 rpm、10分、4°C）した後、上清を-80℃にて保存します。

また、24穴タイタープレートに9mm程度の穴あけを行い、透析カップを配置することで、写真(右上)のような収まりの良い透析が可能です。下図をご参考ください。（クリックで拡大されます）