C末端タグ鋳型DNAの構造
C末端タグ鋳型DNAの構造および各パートの配列は以下の通りです。
tag sequenceは下表のいずれか1つを選んでください。または任意の配列を用意してください。
Linker_Cは適当なプロテアーゼ認識配列に変更可能です。
Construct
5′ UTR | 3’UTR | ||||
5′ | ATG | STOP | 3′ | ||
T7 Promoter | Enhancer | ORF | Linker_C | tag sequence |
Tail sequence |
Part / Sequence
Region | Site | DNA Sequence | Tag |
5′ UTR | T7 Promoter | CCCGCGAAAT TAATACGACT CACTATA | |
Enhancer | GGGCTCACCT ATCTCTCTAC ACAAAACATT TCCCTACATA CAACTTTCAACTTCCTATT | ||
Translated Region | ORF | ATG + NNNNN ・・・ ・・・NNNNN | |
Linker_C | GGT CTC CAG CAG GGA GGT ACT ( Gly-Leu-Gln-Gln-Gly-Gly-Thr ) | ||
tag sequence | CAT CAT CAT CAT CAT CAT | 6x His | |
GAC TAC AAG GAT GAC GAT GAC AAG | FLAG | ||
TAT CCT TAT GAC GTG CCT GAC TAT GCC | HA | ||
TGG TCC CAC CCT CAA TTC GAG AAG | strep II | ||
Stop codon | TAA, TAG, TGA | ||
3′ UTR | Tail sequence | AAAAAAAAAA GAGCTCTTGG ATCCGGCCAT AAGGGCCTGATCCTTCGAGG GGGGGCC |